1.

蛋白质电泳基本原理介绍以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持物的一种电泳方法，人为控制聚丙烯酰胺凝胶聚合成孔径的大小，通过类似分子筛的作用把蛋白质分开。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)。非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。而SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。SDS是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇，二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量，这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。蛋白质的迁移率仅取决于蛋白质的分子质量的大小。与已知分子质量的标准品比较，可以测定蛋白质的分子质量。

2.

聚丙烯酰胺凝胶电泳系统介绍

聚丙烯氨酰基质电泳的早期形式，即在自由溶液中进行的移动界面电泳已成为历史，代之以采用支持介质的区带电泳现在被广泛的使用。采用支持介质的目的是防止电泳过程中的对流和扩散，以使被分离的成分得到最大分辨率的分离。支持介质应具备以下特征：化学惰性，不干扰大分子的电泳过程，化学稳定性好，均匀，重复性好等。固体支持介质可分为两类：一类是如纸、醋酸纤维素膜、硅胶、纤维素等。另一类是如淀粉、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶等。目前，第一类支持介质已逐渐被第二类支持介质所替代。其中，聚丙烯酰胺凝胶，由于它的高分辨率，已成为目前生化实验室最常用的支持介质。聚丙烯酰胺凝胶（polyacrylamide gel，PAG）是由单体丙烯酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂N,N'-甲叉双丙烯酰胺（N,N'-methylenebisacrylamide）在催化剂和加速剂作用下聚合交联而成的三维网状结构的凝胶。一般用于蛋白质电泳的凝胶选用29:1的丙烯酰胺与N,N'-甲叉双丙烯酰胺的混合物，以过硫酸铵作为引发剂进行聚合。

连续电泳和不连续电泳连续电泳是指电泳